【***** 維護(hù)保養(yǎng)】液相色譜法作為一種新型分析、分離技術(shù)，擁有高分析效率、高靈敏度的特點(diǎn)，在食品檢測、生物制藥、化妝品檢測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。同其他檢測方法相比，液相色譜法檢測范圍廣、技術(shù)易于推廣，且在檢測技術(shù)上不斷推陳出新，已成為**分析化學(xué)界發(fā)展zui快的學(xué)科之一。　　隨著液相色譜技術(shù)的不斷進(jìn)步，各大儀器廠商也紛紛推出新款液相色譜儀。這些產(chǎn)品具備更先進(jìn)技術(shù)、更高靈敏度、更快分類效率、更短分析時(shí)間，并逐步朝著智能化、自動(dòng)化的方向前進(jìn)，在檢測領(lǐng)域擁有著廣闊前景。隨著產(chǎn)品在市場的投放，這些新款液相色譜儀也隨之成為各檢測機(jī)構(gòu)儀器采購名單的常客。下面讓我們一起來看看這些液相色譜儀應(yīng)當(dāng)如何維護(hù)保養(yǎng)吧?！　∫合嗌V泵的使用和維護(hù)注意事項(xiàng) ：　　1 防止**固體微粒進(jìn)入泵體，因?yàn)閴m?；蚱渌?*雜質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的**固體微粒。流動(dòng)相在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜(0.2µm或0.45µm)等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換?！　? 泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動(dòng)相被用完，否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞、缸體或密封環(huán)，zui終產(chǎn)生漏液?！　? 輸液泵的工作壓力決不要超過規(guī)定的zui高壓力，否則會(huì)使高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液。　　流動(dòng)相：　　1 純度 流動(dòng)相必須用HPLC級(jí)的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾)。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累，會(huì)影響色譜柱的使用壽命。　　2 溶解度 樣品的溶解度要適宜如果溶解度，如果溶解度欠佳樣品會(huì)在柱頭沉淀，不但影響純化分離，還會(huì)縮短柱子的使用壽命?！　? 粘度要低(應(yīng)<2cp) 高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會(huì)使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相?！　? 樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。 **液相色譜儀的特點(diǎn)

**液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、。分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。

1.進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。

2.輸液系統(tǒng)該系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。

高壓泵的一般壓強(qiáng)為l。47～4。4X107Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí)，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動(dòng)速度，這對(duì)提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。

流動(dòng)相貯存錯(cuò)和梯度儀，可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。

這就可使各種物質(zhì)(即使**一個(gè)基團(tuán)的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離。

3.分離系統(tǒng)該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm(需要兩根連用時(shí)，可在二者之間加一連接管)，內(nèi)徑為2～5mm，由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成)。

固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成，它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達(dá)1000?)和比表面積大的特點(diǎn)，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣)，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機(jī)化合物。

因此，這類固定相對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。

例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后，就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來。

另外，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達(dá)到均勻、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng)。基質(zhì)粒度小，微孔淺，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對(duì)縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。

根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)N就越大。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小，會(huì)提高分辨率的道理。

再者，**液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C，通過改善傳質(zhì)速度，縮短分析時(shí)間，就可增加層析柱的效率。